从组织到单细胞：杜恩斯匀浆器的精细化应用指南

　　杜恩斯匀浆器凭借其温和的机械破碎原理，成为细胞器分离、核酸提取等实验的核心工具。其由磨砂玻璃管与配套研磨杵组成，通过手动推拉旋转产生剪切力，实现组织或细胞的精准破碎。杜恩斯匀浆器尤其适用于肝脏、脑组织等软质样本，以及培养细胞的匀浆处理，能有效保留细胞核、线粒体等亚细胞结构完整性。
 

　　一、操作流程：四步实现高效匀浆

　　1.样本预处理：将新鲜组织（如小鼠肝脏）切成1-3mm3小块，或直接取培养细胞沉淀，置于冰上预冷。例如，在RNA提取实验中，需立即用冰冷PBS清洗组织以抑制RNase活性。

　　2.匀浆器准备：选择与样本量匹配的规格（如10ml或30ml玻璃匀浆器），安装配套的“松型”研磨杵。部分实验需预装裂解液（如CER I试剂），体积通常为样本重量的5-10倍。

　　3.匀浆操作：将样本转移至玻璃管中，手动匀速推拉研磨杵20-30次。例如，在果蝇头部核蛋白提取实验中，需在冰上匀浆至溶液均一，避免局部过热导致蛋白变性。

　　4.离心分离：将匀浆液转移至离心管，4℃条件下以2000-16000g离心5-10分钟，根据实验需求分离上清（细胞质提取物）或沉淀（细胞核/线粒体）。

　　二、关键优势与注意事项

　　该设备通过可调节的研磨力度实现“温和破碎”，避免高速离心或超声处理导致的结构损伤。例如，在痘苗病毒纯化实验中，杜恩斯匀浆器与蔗糖梯度离心结合，可高效分离病毒颗粒与细胞碎片。但需注意：操作全程需冰浴以维持低温环境；研磨杵需定期更换以防止交叉污染；硬质组织需先用碎肉机预处理。